《表1 RT-qPCR所用引物序列》

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《卵巢癌组织中带状疱疹透明带样结构域蛋白1 mRNA表达与肿瘤增殖、侵袭及自噬相关基因表达的相关性》

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利用一步法反转录荧光定量试剂盒检测CUZD1 mRNA、增殖相关基因[β-连环蛋白（β-catenin）、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、C-myc]、侵袭相关基因[核转录因子κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）、钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、肿瘤转移相关基因1（metastsis associated gene 1，MTA1）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9，MMP-9）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和整合素α2（integrinα2，ITGA2）]、自噬相关基因[bcl-2同源结构域样蛋白1（bcl-2 homeodomain protein 1，Beclin1）、微管相关蛋白1轻链3（microtubuleassociated protein 1 light chain 3，LC3）]的表达情况，以β-actin和甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）为内参基因，所用引物序列见表1。20μL反应体系:2×onestep RT-qPCR Master Mix 10μL、正向引物200 nmol、反向引物200 nmol、RT enzyme Mix 0.65μL、RNA Template 4μL、剩余体积用dd H2O补足。反应程序:42℃反转录30 min，95℃预变性3 min，95℃变性10 s、50～60℃退火（以基因为准）10 s、72℃延伸/采集荧光信号30 s（40个循环）。ABI7500 RT-qPCR仪自动生成熔解曲线。用无模板和无转录反应模板作阴性对照。2-△△Ct的方法进行相对定量分析。