《表4 引物序列：大豆GmEIF4B1基因的克隆及表达分析》

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《大豆GmEIF4B1基因的克隆及表达分析》

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取‘东农50’成熟的种子进行提取RNA及反转录，根据拟南芥EIF4B1基因（核酸序列号为NM＿113547）的CDS序列，在phytozome上与大豆（Glycine max）进行Blast比对，在大豆基因组数据中获得同源最高序列进行克隆，在该基因上下游设计引物（表4）用于扩增目的基因。以大豆种子总RNA作为模板进行PCR扩增，反应体系为：c DNA 2μL，2×Phanta Max Master Mix 7μL，GmEIF4B1-F0.5μL，GmEIF4B1-R 0.5μL，ddH2O 7μL。PCR反应条件为：94℃预变性3 min，94℃变性30 s，58℃退火30 s，72℃延伸2 min，扩增30个循环，72℃终延伸7 min，4℃终止保存。