《表2 IMS中常用食源性致病菌抗体信息》

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《免疫磁分离技术在食源性致病菌快速检测中的研究进展》

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注：NR.未报道（not reported）。下同。

抗体是IMS中识别、捕获和集中来自食物样品中靶病原体的分子，对免疫磁分离效果具有至关重要的影响。为了使富集效果最佳，使用的抗体应具备特异性好、排他性强与效价高等特点，即抗体与食源性致病菌需具备高亲和度，且不与其他细菌进行交叉反应，抗原抗体结合反应灵敏度高[30]。抗体有单克隆抗体和多克隆抗体之分，在IMS分离食源性致病菌中均有应用。单克隆抗体具有较高的稳定性与特异性，其效果优于多克隆抗体，但制备周期长、价格昂贵且敏感度不及多克隆抗体。抗体的选择至关重要，目前市面上专门针对食源性致病菌的抗体相关产品（抗血清、纯抗体等）并不多见，特别是不常见食源病原微生物（表2）。国内外食源性致病菌抗体品牌以美国Thermo Fisher公司、Meridian Life Science公司、KPL公司为代表，但价格昂贵且量少。也有研究人员选择实验室自制抗体或将抗原灭活后交抗体公司免疫，但耗时长（至少需要2个月时间），且抗体特异性和有效性较前者低。另外，在进行大容量IMS的实际应用研究时，活性抗体与磁珠和靶细菌结合的先后顺序也会影响磁分离效果。这是由于固定在磁珠的抗体运动性能较游离抗体弱而导致真正捕获在IMBs上目标细菌的量少，特别是在大体积的体系中。为了确保免疫磁珠对靶细菌的高捕获效率，Luo Dan等[31]采用新型IMS方法，即首先将生物素化单增李斯特菌单克隆抗体与10 mL单增李斯特菌特异性结合，然后与链霉亲和素磁珠偶联。结果表明巴氏杀菌乳中单增李斯特菌捕获效率大于90%，而生物素化抗体的使用量仅约为常规IMS的7%，大幅节约了检测成本。