《表1 高产油突变体在摇瓶发酵时的脂肪酸组成》

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《裂殖壶菌高产油突变体的高通量筛选》

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本研究中筛选得到的这3株突变体已证实油脂量均有所增加，但进一步分析发现，相较于WT，它们在摇瓶发酵时的各脂肪酸组成的变化趋势并不一致（表1）。这说明这3株突变体可能突变的基因或通路存在差异。目前发现，裂殖壶菌可能同时存在两种脂肪酸合成通路：负责肉豆蔻酸（C14:0）、软脂酸（C16:0）和硬脂酸（C18:0）等饱和脂肪酸合成的Ⅰ型脂肪酸合酶通路（TypeⅠfatty acid synthase pathway，FAS）和负责如EPA（C20:5）、DPA（C22:5）和DHA（C22:6）等多不饱和脂肪酸合成的多聚酮合酶通路（Polyketide synthase pathway，PKS），并且这两条通路都是由乙酰辅酶A（Acetyl-CoA）作为前体物质和由NADPH提供还原力的[42-46]。突变体D01521的脂肪酸组成结果显示，饱和脂肪酸如C14:0、C16:0和C18:0均不同程度上升，其中C16:0占油脂含量（34.24%）较WT（25.51%）上升明显，而不饱和脂肪酸DPA和DHA含量则相对下降了。那么在突变体D01521中，突变的基因可能发生在FAS通路后端，导致C16:0等饱和脂肪酸合成增加，而PKS通路中基因并未发生突变，从而使得DPA与DHA占总油脂的含量相对下降。而突变体D03432和D05106的脂肪酸组成结果显示，相较于WT，C16:0等饱和脂肪酸含量均有所增加，但DHA等不饱和脂肪酸含量并未出现明显差异。这说明D03432和D05106中突变的基因可能发生在乙酰辅酶A的合成通路前端或者乙酰辅酶A其他消耗通路中，导致乙酰辅酶A更多地流入脂肪酸合成通路中，从而使得各脂肪酸的含量都相对增加了。裂殖壶菌脂肪酸合成通路的具体机制并没有完全解析清楚，因此这3株高产油突变体的具体突变基因或通路还有待进一步验证。