《表1 实验营养液配方:马尾松PmWRKY164基因的克隆及耐低磷功能分析》

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《马尾松PmWRKY164基因的克隆及耐低磷功能分析》


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实验采用由贵州都匀马寨马尾松国家林木良种基地提供的马尾松(Pinus massoniana)良种为研究材料,经表面消毒和催芽处理后,种植于珍珠岩介质的胸径13.5 cm的营养钵中。待出芽后转移至光照培养箱中生长,温度设置为25℃/20℃,光照(光强2000 lx)时间为14 h/d。出芽30 d后间苗,进行3个不同浓度的低磷胁迫处理,处理的营养液以霍格兰和阿农微量元素营养液为基础(秦晓佳,丁贵杰,2012)(表1) ,通过添加KH2PO4调节成3个磷浓度梯度:中磷(CK1)10 mg/L,重度低磷胁迫(P1)0.5 mg/L,中度低磷胁迫(P2)2.0 mg/L,并相应调整KNO3和Ca(NO3)2·4H2O的含量以满足幼苗对N、K的需求,此外在配制时添加Fe盐溶液25μmol/L。对照和处理共5个时间段(12,24,36,48和60 d),每个处理重复3次,每4 d浇1次营养液(200 m L)。取马尾松全苗迅速液氮处理后于-80℃冰箱存储备用。