《表1 实验所用引物:乙烯处理水仙催多花技术和机理的研究》

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《乙烯处理水仙催多花技术和机理的研究》


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用东盛生物通用RNA提取试剂盒R1051(广州东盛生物科技有限公司)提取水仙鳞茎总RNA,用SYBR ExScriptTMRT-PCR Kit(日本TaKaRa公司)将各样品的RNA 550 ng进行逆转录。在筛选基因的3'端非保守区设计引物,引物序列见表1。采用水仙Ntactin基因作为内参基因,进行qRT-PCR扩增。反应总体积为20μL,包含SYBR Premix Ex Taq TM 10.0μL,cDNA 20 ng,上、下游引物(10μmol/L)各0.5μL,双蒸水8.0μL。扩增程序为95℃预变性3 min,95℃变性15 s,60℃退火15 s,72℃延伸20 s,40次循环。采用2-ΔΔCt法分析qRT-PCR数据,SPSS 13.0进行邓肯氏多重比较,Excel软件作图。