《表2 本研究中所用引物》

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《飞蝗内表皮结构糖蛋白基因LmAbd-2的表达与功能分析》

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组织特异性表达分析:解剖发育整齐的5龄第2天（N5D2）飞蝗若虫的体壁（integument，IN）、前肠（foregut，FG）、中肠（midgut，MG）、后肠（hindgut，HG）、胃盲囊（gastric caeca，GC）、马氏管（Malpighian tubules，MT）、脂肪体（fat body，FB）和翅芽（wing pad，WP）8个不同组织，设置4个生物学重复，每个重复3头虫体。时期表达分析:选取并解剖4龄第1—6天飞蝗若虫（N4D1—N4D6）、5龄第1—8天飞蝗若虫（N5D1—N5D8）和成虫第1—4天（AD1—AD4）第2腹节处体壁组织，设4个生物学重复，每3头虫体组织为一个生物学重复，组织样品冻存于液氮中。利用动物组织RNA提取试剂RNAisoTM Plus（Ta Ka Ra公司）提取上述不同组织和不同发育时期体壁组织的总RNA，使用1%的琼脂糖凝胶电泳检测RNA的质量，利用Nanodrop 2000对总RNA进行定量。以1μg总RNA为模板，使用c DNA反转录试剂（Ta Ka Ra公司）合成c DNA模板。采用荧光定量PCR方法（reverse-transcription quantitative PCR，RT-q PCR）检测LmAbd-2在5龄第2天飞蝗不同组织部位及不同发育时期体壁中的表达情况。RT-qPCR反应体系和程序参考文献[25]。β-actin（KX276642）作为内参基因，引物见表2（由上海生工生物公司合成）。