《表1 PCR及荧光定量PCR所用引物及反应程序》
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《不同利用方式对内蒙古羊草草原氨氧化微生物丰度的影响》
注:F为上游引物,R为下游引物
采用实时荧光定量PCR测定土壤氨氧化古菌和细菌(AOA和AOB)的丰度,对氨氧化微生物的氨单加氧酶活性多肽位点基因(amoA基因)进行定量分析。其定量PCR均采用SYBRGreen法。AOA和AOB定量均采用定性分析所用引物(表1)。扩增体系为20μL,包含:SYBR Premix Ex TaqTM10μL,正反向引物各0.5μL,DNA模板2μL,ddH2O 7μL。采用ABI 7500实时定量扩增PCR仪,对氨氧化微生物进行定量分析。试验设置阴性对照,并将已知拷贝数的质粒DNA梯度进行稀释,得到标准曲线,每个样品3次重复,标线和样品的溶解曲线为单一峰。
图表编号 | XD0050142300 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.03.01 |
作者 | 朱蕊、陈清、马成仓、王中良 |
绘制单位 | 天津师范大学天津市水资源与水环境重点实验室、天津师范大学生命科学学院、天津师范大学天津市水资源与水环境重点实验室、天津师范大学生命科学学院、天津师范大学天津市水资源与水环境重点实验室 |
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