《表1.引物序列：毕赤酵母表达的嗜热蓝状菌β-葡萄糖苷酶N-糖基化修饰的作用与功能》

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《毕赤酵母表达的嗜热蓝状菌β-葡萄糖苷酶N-糖基化修饰的作用与功能》

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将筛选出的酶活高的转化子在YPD进行培养16 h，接入到装有400 mL BMGY培养基的1 L三角瓶中，30°C、200 r/min摇床培养48 h。将菌液进行离心（6000 r/min，10 min），上清液去掉，然后加入200 mL BMGY培养基重悬菌体，30°C、200 r/min摇床培养，每12 h补加2 mL甲醇溶液，摇床培养48 h。将培养基上清液于12000 r/min离心10 min，弃菌体得到粗酶液后用30 kDa的膜包进行超滤浓缩。浓缩后的酶液用磷酸-柠檬酸缓冲液（pH 6.5）过夜透析进行脱盐处理。将处理后的酶液加入已平衡的HiTrap QXL阴离子柱，用0–1 mol/L的NaCl进行梯度洗脱，并用96孔板收集。对收集管中的β-葡萄糖苷酶活性进行测定，将有酶活的酶液收集，取7μL进行N-糖基化的脱糖基处理（Endo-H），并进行SDS-PAGE检测。