《表1 各反应物顺序和添加量》

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《桦褐孔菌多糖对糖尿病大鼠糖脂代谢水平的影响》


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献[8]方法进行α-葡萄糖苷酶活性的分析。实验分为空白组(不添加样品和酶)、阴性对照组(添加酶,不添加样品)、样品空白组(添加样品,不添加酶)和样品组(添加样品和酶),在96孔板中加样,每组设置3个平行。按表1依次加入PBS缓冲液、样品和底物,混合均匀,于37℃培养箱中保温10 min后取出,加入37℃水浴的酶溶液,充分混匀,于37℃培养箱中反应20 min,结束后加入150μL 0.2 mol/L的Na2CO3溶液中止反应。由于4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)在α-葡萄糖苷酶的作用下能水解产生葡萄糖和4硝基苯(PNP),PNP在405 nm处有最大吸收,测定其吸光度,根据公式计算出各样品α-葡萄糖苷酶的抑制率及IC50值。