《表1 用于扩增ACT、GAPDH、ITS、TUB2和CHS-1基因序列的引物》

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《福建砂梨急性花枯病病原菌的分离与鉴定》

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将供试菌株的菌丝块放置在铺有灭菌玻璃纸的PDA培养基中央，置于28℃、黑暗条件下的智能光照培养箱中培养，6 d后收集菌丝。采用CTAB法提取每个分离物的基因组DNA[7]，并通过1.2%琼脂糖凝胶电泳后检测DNA质量。使用引物对ACT-512F/ACT-783R、T1/Bt2b、CHS-79F/CHS-345R、GDF1/GDR1和ITS4/ITS5分别对供试菌株的ACT、TUB2和CHS-1基因的部分序列、GAPDH 200 bp的内含子以及ITS序列进行PCR扩增。具体引物信息见表1[8-10]。PCR反应体系和扩增程序参考前人的方法[11-12]。使用PCR产物纯化试剂盒（生工生物工程（上海）股份有限公司）纯化PCR扩增得到的目的片段，并将纯化产物送至该公司进行测序。