《表2 q PCR引物序列》

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《太原市冬季PM_(2.5)对人源巨噬细胞U937毒性作用的研究》


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U937巨噬细胞暴露于PM2.56 h,24 h和48 h后,使用RNA提取试剂盒提取U937巨噬细胞中RNA,使用c DNA反转录试剂盒将RNA转化c D‐NA。PCR的反应体积为20μL,按每管10μL SYBR,8.2 m L dd H2O、0.4μL正向引物、0.4μL反向引物、1μL c DNA模板加样,采用IQ5实时定量PCR仪扩增。反应条件为94℃变性15 s,60℃退火20 s,72℃延伸10 s,均扩增45个循环,将c DNA按1倍、3倍、9倍、27倍稀释作标准曲线,采用IQ5软件将所测结果与β-actin基因的结果作比值来确定目的基因的表达量。实验中所使用的引物序列见表2。