《表1 q PCR引物序列》

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《红蓝光调控茉莉开花的转录组分析》


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筛选出受光质影响的代谢通路差异表达基因序列设计荧光定量PCR引物(表1),以同期茉莉花不同光质处理的叶片c DNA为模板,Actin为内参,按照Transstart?Tip Green q PCR super Mix试剂盒(北京全式金生物技术有限公司)的操作说明进行RT-q PCR反应,验证转录组测序的可靠性,每个处理设置3个生物学重复,用2-??Ct法进行定量分析。反应体系为10μL:1μL茉莉花叶片c DNA,0.2μL Forward Primer,0.2μL ReversePrimer,5μL Transstart?Tip Green q PCRSuper Mix,补3.6μL dd H2O至10μL。扩增程序:94℃预变性30 s,94℃变性5 s,60℃复性30 s (第二步至第三步重复40个循环)。