《表1 q PCR引物序列》

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《骨质疏松肾阳虚、肾阴虚证型下右归丸含药血清对大鼠成骨细胞ERK1/2、Wnt/β-catenin信号通路的影响》


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2.主要药物及试剂黑顺片(批号:131214,产地:四川);熟地黄(批号:130807,产地:河南);山药(批号:140226,产地:浙江);枸杞(批号:140211,产地:宁夏);山茱萸(批号:131115,产地:浙江);当归(批号:131227,产地:甘肃);菟丝子(批号:141204,产地:辽宁);肉桂(批号:131226,产地:广西);杜仲(批号:140107,产地:浙江);鹿角胶(批号:20120103,产地:河南),均购自华东医药股份有限公司药材参茸分公司,经鉴定为正品。Ⅰ型胶原酶(GIBCO分装);DMEM高糖型培养液(Hyclone);胎牛血清(FBS,Gibco,USA);0.25%胰酶-EDTA(Sigma,USA);0.01mol/L PBS(杭州吉诺生物医药技术有限公司);红细胞裂解液(南通碧云天生物科技);ALP染液(南京建成生物工程研究所);茜素红(Sigma,USA);MTS(Promaga,批号:0000094244);RIPA裂解液(批号:00011401,康为生物);蛋白酶抑制剂混合物(批号:WBP1265,达文生物);ALP含量测定试剂盒(南京建成生物工程研究所);二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量试剂盒(批号:00061311,康为世纪);甘氨酸(amresco,批号:9978c366);十二烷基硫酸钠(SDS)(amresco-2227) ;AP(amresco-0496);TEMED(上海远慕科技);Tris-base(amresco-0497);TBST缓冲液(上海樊克生物);1.5mol/L Tris-Cl(p H值8.8),1.0mol/L Tris-Cl(p H值6.8)(碧云天生物科技,南通) ;5×SDS上样缓冲液、预染marker(康为世纪);PVDF膜(批号:K4AA7969,Immobilon);1×TAE电泳缓冲液、溴化乙锭溶液(EB)、琼脂糖、6×加样缓冲液、细胞总RNA提取试剂盒(杭州宝赛生物,批号:RE02050)、Dnase I(Promega,批号:M6101);反转录试剂盒(杭州宝赛,批号:RT02020);荧光定量试剂盒(杭州宝赛,批号:PM10003)。引物序列信息及蛋白免疫印迹法所需抗体信息见表1-表2。