《表1 q PCR引物序列》

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《RP11-273G15.2靶向微小RNA-9-5p对肝癌细胞增殖和凋亡的影响》

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注:F，上游引物；R，下游引物

采用TRIzol提取细胞中总RNA，经Nanodrop紫外分光光度计鉴定合格后，取1μg总RNA与1μl 10×ezDNaseTMBuffer、1μl ezDNaseTMEnzyme混合后用Nuclease-free H2O补齐至10μl以制备模板RNA，随后经SuperScriptTM IV One-Step RT-PCR System和ABI 7300型实时荧光定量PCR仪进行q PCR，50μl反应体系:10μl RNA模板、25μl 2×PlatinumTMSuperFiTMRT-PCR Master Mix、10μmol/L上下游引物各2.5μl、SuperScriptTMIV RT Mix 0.5μl，Nuclease-free H2O补齐；反应条件:60℃10 min，98℃2 min，35个循环的98℃10 s、55～72℃10 s、72℃30 s，最后72℃延伸5min。采用2-ΔΔCt表示RP11-273G15.2、Bcl-2、Bax和caspase-3相较于内参GAPDH或miR-9-5p相较于内参U6的相对表达量。qPCR引物序列见表1。