《表1 q PCR引物序列》

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《TGF-β1信号介导的肝星状细胞促进胚胎肝前体细胞向胆管细胞方向分化》


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用TRIzol试剂提取m HSCs总m RNA;用RNAprep Pure微量RNA提取试剂盒提取共培养6 d后的m HPCs总m RNA。按照Western Biotechnology反转录试剂盒说明书操作反转录为c DNA,引物设计见表1。反转录条件:25℃10 min,42℃50 min,85℃5 min。按照Western Biotechnology荧光定量PCR扩增试剂盒说明书操作,扩增条件设置:94℃预变性4 min,94℃变性30 s,60℃退火30 s,72℃延伸30 s,循环40次,72℃检测信号。使用2-△△CT法来计算相对m RNA含量,△CT=CT(目的基因)-CT(管家基因GAPDH),△△CT=△CT(激活组)-△CT(对照组),2-△△CT表示激活组目的基因m RNA的含量相对对照组所改变的倍数。