《表1 q PCR引物序列》

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《藤黄可乐化学成分及其抗氧化活性研究》

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THP-1细胞以4×105个每孔接种在孔板中，重复孔，培养后，细胞分组及药物处理方法同“1.7”项下；孵育24 h，收集细胞，加入1 mL RNAiso plus裂解细胞，提取总RNA，检测RNA含量和浓度（A260/A280=1.8～2.0）。采用5×All-in-One RT Master Mix逆转录试剂盒进行逆转录反应，反应条件为：25℃5 min，42℃15 min，85℃5 min，20℃保持。然后进行PCR反应，反应体系为10μL，反应条件：预变性95℃2 min，变性95℃15 s，退火60℃1 min，共40个循坏。扩增反应后进行熔解曲线分析，判断产物是否有非特异性扩增；分析扩增曲线，计算Ct值；以GAPDH作为内参基因，采用2-ΔΔCt法计算各组间mRNA表达水平差异；实验重复3次。引物合成由TaKaRa大连宝生物工程有限公司合成，引物序列见表1。