《表1 q PCR引物序列》

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《长链非编码RNA RP5-919F19对胃癌细胞增殖和侵袭迁移的影响》

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注:F，上游引物；R，下游引物

细胞转染48 h后向每孔细胞中加入1 ml TRIzol试剂提取总RNA，采用One Step TB GreenPrimeScriptTMRT-PCR Kit根据试剂盒说明书进行qPCR，25μl反应体系:总RNA 2μl、PrimeScript RT enzyme MixⅡ和TaKaRa Ex Taq HS（5 U/μl）各0.5μl、2×One Step TB Green RT-PCR BufferⅢ12.5μl、上下游引物（10μmol/L）各0.5μl，RNase-free H2O补齐。反应条件:（1）反转录反应:42℃5 min、95℃10 s；（2）PCR反应:95℃5 s、60℃30 s共40个循环。整个qPCR操作参考StepOnePlus Real-Time PCR System的操作方法，以GAPDH作为内参，采用2-ΔΔCt法表示RP5-919F19的相对表达量。qPCR引物序列见表1。