《表1 q RT-PCR引物》

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《尿毒康通过抑制p38/ERK MAPK通路改善UUO大鼠肾小管细胞上皮-间质转化》

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取肾脏组织剪碎后加入1 m L Trizon后反复吹打，使样本充分裂解。加入200μL氯仿，剧烈振荡15 s，室温放置2min。4℃12000r/min离心15min，离心半径8cm，取上层水相层。加入等体积的异丙醇，颠倒混匀，室温放置10 min。4℃12 000 r/min离心10 min，弃上清。加入1 m L 75%乙醇洗涤沉淀。4℃12 000 r/min离心5 min，离心半径8 cm，弃上清，挥干。加入30μL无RNase的水溶解。根据Hi Fi Script g DNA Removal c DNA Synthesis Kit（康为世纪，Cat:CW2582M）说明书配制反应体系，42℃15 min，85℃5 min逆转录为c DNA。根据Ultra SYBR Mixture（Low ROX）（康为世纪，Cat:CW2601M）进行实时定量反应：预变性95℃5 min，（变性95℃15 s，退火60℃1 min，延伸72℃30 s）45 cycles，95℃15 s，60℃1 min，95℃15 s，60℃15 s。2-ΔΔCt计算m RNA的相对变化。