《表1 q RT-PCR引物》

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《大豆11S/7S球蛋白比值QTL定位及相关基因分析》


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Trizol法提取种子RNA,反转录试剂盒(Vazyme)反转录成c DNA。为确定候选基因在不同材料中转录水平,使用Light Cycler480系统和Primer 5软件设计引物作q RT-PCR分析。通过Primer 5软件设计6个候选基因特异性引物,内参基因为Gm Actin4(Gen Bank No:AF049106),引物序列见表1。退火温度范围为55.8~59.1℃,试验温度为57℃。候选基因转录水平根据2-ΔΔct计算。为保证试验准确性和可靠性,每个样品3次重复。