《表1 p NPG法测定α-葡萄糖苷酶活力方法》

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以p NPG为反应底物,经α-葡萄糖苷酶水解α-1,4-葡萄糖苷键后释放出对硝基苯酚,在波长410 nm处检测黄色对硝基苯酚的生成量作为酶活力大小的判定标准[22]。样品提取液配制成5.00 mg/m L的母液,再稀释成5.00、4.00、3.00、2.00、1.00、0.20、0.10、0.05 mg/m L。向5 m L试管中依次加入0.10 mol/L的磷酸钾缓冲液(p H 6.8)、不同质量浓度的样品提取液和α-葡萄糖苷酶(1 U/m L)后,37℃水浴加热20 min。然后加入p NPG溶液(2.50 mmol/L)作为反应底物以启动反应,于37℃水浴条件下反应30 min。最后加入610μL 1 mol/L Na2CO3溶液终止反应,于波长410 nm处测定各组OD值,每组实验平行测定3次。实验各组物质加入量如表1所示。