《表3 本实验中使用的引物序列》

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《水飞蓟来源黄酮3-羟化酶鉴定及黄杉素发酵优化》

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在实验室保存的高产圣草酚的质粒p Y26-P05mut12基础上，融合Sm F3H表达框，Sm F3H由不同启动子起始转录。首先在T载体上构建Sm F3H与不同启动子融合的表达框，经过Gibson组装获得p MD-P1Sm F3H、p MD-P2Sm F3H、p MD-P3Sm F3H、p MD-P4Sm F3H、p MD-P5Sm F3H和p MD-P6Sm F3H。依次扩增上述6个质粒中Sm F3H的表达框并与线性化的p Y26-P05mut12经Gibson组装依次获得p Y26-P5m1、p Y26-P5m2、p Y26-P5m3、p Y26-P5m4、p Y26-P5m5和p Y26-P5m6。测序正确后将上述6个质粒转化至菌株C800中，得到菌株C800P5m1–C800P5m6。将启动子优化的6株菌进行发酵，检测最佳启动子组合。本实验所有引物在表3中列出。