《表1 q RT-PCR引物序列》
注:F表示正义链,R表示反义链。
根据Invitrogen公司TRIzol试剂说明书,用TRIzol提取肝组织总RNA。用Nano Drop 2000超微量分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测纯度和完整性。而后,按照Ta Ka Ra公司的m RNA逆转录试剂盒逆转得到相应的c DNA。随后,使用SYBR Premix Ex Taq试剂盒和CFX96荧光定量仪对脂肪酸代谢相关基因进行检测,PCR反应体系10μL:c DNA 1μL,上下游引物各0.5μL,SBYR Premix Ex Taq 5μL,DEPC水3μL。PCR反应条件:90℃预变性10 min,95℃变性10 s,60℃退火30 s,72℃延伸15 s,共40个循环。以β-actin作为m RNA的内参基因,使用2-ΔΔCt[8]方法计算各基因的相对表达量。实验所用引物序列见表1。
图表编号 | XD00205744800 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.12.28 |
作者 | 王灵慧、吴霜、堵晶晶、张锫文、王定国、杨东丽、张顺华、朱砺 |
绘制单位 | 四川农业大学动物科技学院、禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室、四川农业大学动物科技学院、禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室、四川农业大学动物科技学院、禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室、四川农业大学动物科技学院、禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室、成都市动物疫病预防控制中心、泸州市农业农村局、四川农业大学动物科技学院、禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室、四川农业大学动物科技学院、禽遗传资源发掘与创新利用四川省重点实验室 |
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