《表1 基因引物序列及退火温度》

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《肝癌细胞HepG2外泌体对其自身生长行为的影响及其机制研究》

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选定细胞周期相关基因细胞周期蛋白（Cyclin D）、细胞周期蛋白依赖性激酶调节亚基1(CKS1），凋亡相关基因B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2）、Bcl-2相关x蛋白（Bax）进行检测[6-8]。提取0.5 mg/mL外泌体处理的细胞作为实验组，没有外泌体处理的细胞作为对照组。提取两组细胞的RNA进行反转录，再进行qPCR扩增，体系为20μL，其中上下游引物各0.4μL，cDNA模板0.4μL，去离子水8.8μL，SYBR Premix ExTaqⅡ10μL。反应程序为95℃，15s；60℃，30s；72℃，30s；共40个循环。60～95℃绘制熔解曲线。内参为β-actin，用2-ΔΔCt法对各基因的相对表达水平进行计算，实验独立重复3次。见表1。