《表1 基因的引物序列及退火温度》

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《结肠癌病灶内HOXB7基因表达量的变化及其与肿瘤病理特征的相关性》

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手术切除后，收集结肠癌病灶及癌旁病灶适量各约1cm×1cm×1cm，用生理盐水清洗后在滤纸上吸干，而后放置在-70℃冰箱保存。检测时，取结肠癌病灶及癌旁病灶约50mg，采用TRNzol总RNA提取试剂盒进行操作并分离得到RNA，RNA用DEPC水溶解后按照FastQuant RT Super Mix试剂盒进行操作、以RNA为模板反转录合成cDNA；取cDNA样本2μL、SuperReal PreMix Plus试剂10μL、基因引物混合液0.8μL、去离子水7.2μL混合为反应体系，按照95℃20s→特异性退火温度15s→72℃25s的流程重复反应40个循环，得到反应曲线后在软件内自动生成循环阈值（Ct），根据公式2-ΔΔC t计算HOXB7、Notch1、Hes1、P53、ASPP2、WTX、CAT-D、TMEM16a、CBX7、ZEB1、E-cadherin、N-cadherin的mRNA表达量。基因的引物序列及退火温度见表1。