《表1 PCR引物扩增序列》

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《加味温胆汤对抑郁模型大鼠下丘脑GFAP、CD11b、CNPase mRNA表达的影响》


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取材前先进性行为学评价,各组取6只行为学相似大鼠断头处死,取下丘脑备用。使用总RNA提取试剂盒提取下丘脑总RNA,用Fast King c DNA第一链合成试剂盒将m RNA反转录为c DNA。运用Super Real荧光定量预混试剂启动DNA聚合酶,构建Real-Time PCR反应体系:95℃预热15 min预变性,40个循环(95℃10 s变性,56℃20 s退火,72℃30 s延伸)。采用荧光实时定量PCR法,将阈值循环数(Ct)值与不同浓度标准品的对数值拟合作图,得出校正曲线;通过2-△△ct法计算目的基因与内参物(GAPDH)Ct值的差值,表示目的基因的相对表达水平。所需引物见表1。