《表1 q RT-PCR引物序列》
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《黄芪多糖对妊娠期糖尿病大鼠胰岛素抵抗及Nrf2-ARE通路的影响》
注:Nrf2为核因子相关因子2;HO-1为血红素加氧酶-1;γ-GCS为γ-谷胱甘肽过氧化物酶
处死大鼠时采集胰脏组织于液氮中冻存,取出液氮冻存的组织切片50~100 mg,液氮中研磨,Trizol试剂盒提取组织中总RNA,测定RNA的浓度和纯度,反转录试剂盒反转录为cDNA,进行q RT-PCR。qRT-PCR反应体系为20μl:2×SYBR Mix10μl,10×cDNA模板1μl,上下游引物各0.5μl,H2O 8μl。反应参数为:95℃预变性5 min,95℃变性10 s、60℃退火30 s,72℃2 min,40个循环,72℃延伸10 min。收集数据根据2-ΔΔCt算法进行各组m RNA表达量分析,以β-actin作为内参。引物序列见表1。
图表编号 | XD00186605600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.10.20 |
作者 | 彭文达 |
绘制单位 | 湖南省人民医院湖南师范大学附属第一医院药学二部 |
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