《表5 q RT-PCR引物序列》

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《基于高通量测序的露地菊(Chysanthemum×grandiflora)盐胁迫转录组分析》


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选择植物激素信号传导通路及光合通路相关途径的10个基因利用Primer 5设计引物,引物序列已列出(表5)。使用TOYOBO公司的ReverTra Ace qPCR RT Kit试剂盒对RNA样品进行反转录合成cDNA模板,再将cDNA与水以1∶4的比例稀释为5倍,用于反应。采用TOYOBO公司的Thunderbird试剂盒,Roche Light Cycler96实时荧光定量PCR仪进行定量PCR,反应条件为95℃5 s,59℃15 s,72℃30 s,40个循环。选择SAND基因作为内参基因,采用2-ΔΔCT法计算相对表达量。每个样品3次重复。