《表6 本研究所用的SRAP引物序列》

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《利用SRAP标记分析草果遗传多样性》


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根据Li和Quiros(2001)的方法进行SRAP分析。本研究所用到的引物序列(表6)。PCR反应程序为:95℃变性5 min;95℃变性1 min,35℃退火1 min,72℃延伸1 min(5个循环);接下将退火温度升至50℃扩增35个循环;最后72℃延伸7 min,4℃保存。10μLPCR反应体系包括1.25μL10×PCR缓冲液(含Mg2+)、0.2μL Taq DNA聚合酶(1 000 U)、1μL dNTPs(2.5 mol/L)、1.8μL引物(0.2μmol/L)、2μL模板DNA(浓度约10 ng)、3.75μL ddH2O,反应体系所用试剂均购至北京庄盟国际生物基因科技有限公司。扩增在东胜ETC811 PCR仪上进行。在8%非变性聚丙烯酰胺凝胶(丙烯酰胺∶双丙烯酰胺=19∶1)上分离PCR产物,并使用1%的Ag NO3染色。