《表2 qPCR所用引物序列》

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《C-藻蓝蛋白抑制TGF-β1诱导的宫颈癌Caski细胞上皮-间充质转化》

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将细胞按1.2所述分组、加药处理48 h后PBS洗2次，收集细胞，采用TRIzol法提取总RNA，紫外分光光度计测定RNA浓度并鉴定纯度。使用逆转录试剂盒将总RNA逆转录合成cDNA。反应条件为：25℃、5 min，42℃、30 min，85℃、5min，4℃保存cDNA。应用荧光定量PCR仪进行qPCR扩增及检测。q PCR反应条件：95℃预变性5 min，95℃、5 s，60℃、30 s，72℃、20s，65℃、5 s，共进行40个循环。采用2-△△Ct法计算Twist、Snail、Zeb1的mRNA相对表达水平。所用引物序列见表2。