《表1 qPCR引物序列》

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《沉默CDC25A基因后肝癌裸鼠移植瘤组织中差异表达基因的筛选》


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利用逆转录试剂盒将肝癌裸鼠移植瘤总RNA逆转录为c DNA。q PCR方法检测CDC25A、同源结构域相互作用蛋白激酶2(homeodomain interacting protein kinase 2,HIPK2)、微纤丝关联蛋白5(microfibrillarassociated protein 5,MFAP5)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1,CCND1)m RNA的表达水平,以GAPDH为内参。应用Primer5.0软件设计引物(表1)。按q PCR试剂盒说明操作,反应条件为95℃预变性30 s,变性95℃5 s、退火60℃30 s共40个循环。每组样本设置3个重复孔,同时扩增各样本的目的基因和内参基因,实验独立重复3次。采用2-ΔΔCt分析法计算目的m RNA的相对表达量。