《表1 qPCR引物序列》

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《miR-195靶向TLR4并阻断NF-κB通路抑制肝癌细胞HepG2增殖和转移》

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转染48 h后，收集培养的各组细胞。采用TRIzol试剂抽取各组细胞中总RNA，并进行定量分析。随后采用逆转录试剂盒合成cDNA，反应条件为40℃变性60 min、25℃5 min、85℃5 min。然后取2μl逆转录产物进行PCR反应，反应条件为95℃变性15 s、55℃退火30 s、72℃延伸10 s，进行30个循环扩增。qPCR引物序列见表1。采用2-ΔΔCt法以GAPDH为内参计算miR-195和TLR4的表达水平。