《表1 qPCR所用引物序列及退火温度》

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《苋菜AmSPL基因家族转录组鉴定及表达分析》


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然后以转录组测序的蓝光和黑暗处理的‘全红’苋菜胚轴为试验材料,对本研究所筛选的SPL基因进行实时定量荧光PCR扩增,选用AmEF1a为内参,检测AmSPL基因的表达情况,根据SYBR?Premix Ex TaqTMII (Tli RNaseH Plus,Takara,Japan)试剂盒说明书进行qRT-PCR反应液的配制,在LightCycler480Real-time PCR仪器上进行试验,所有试样进行3次重复,采用2-ΔΔct的方法计算AmSPLs基因的相对表达量。根据AmSPL特异序列设计上下游定量引物,内参基因及其引物序列,见表1。