《表1 qPCR所用的引物》

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《印度梨形孢联合紫花苜蓿修复土壤镉污染研究》

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基因差异表达采用荧光定量PCR技术。荧光染料采用SYBR Green，方法流程见[20]。简言，荧光定量PCR采用的仪器为ABI 7500 Fast real-time PCR system（Applied Biosystems）。反应体系包含:1×Super Real PreMix（Tiangen），100 ng cDNA模板，0.3 M引物和1×ROX荧光染料。内参为Actin。反应程序为:95℃，5 min，35个循环（95℃for 20 s，58℃for 35 s，72℃for 40 s，and 65℃for 20 s），最后溶解曲线温度设定保证能扩增出单一的PCR产物。qPCR引物见表1。