《表1 食物蛋白源降尿酸活性肽的制备、分离纯化及结构鉴定列表》

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《食物蛋白源降尿酸活性肽的研究进展》


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酶解法就是利用蛋白酶对底物蛋白质肽链的剪切作用,使得具有降尿酸活性的肽段得以释放的方法[20]。酶解法制备降尿酸活性肽具有生产成本低廉、产品安全性高、制备条件温和、酶解过程易于控制等特点[21],故酶解法是制备降尿酸活性肽最为常用的方法。酶解法中酶的筛选非常重要,常见的蛋白酶有:中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶等。蛋白酶催化水解蛋白质时,肽链的长度、氨基酸的种类和数量都会受到诸多作用条件(加酶量、酶解温度、酶解p H、酶解时间等)的影响,从而影响酶解效果和肽的生物活性[22]。实际操作中需优化获得最佳酶解工艺条件,从而提高降尿酸活性肽的制备效率。表1列出了利用动植物原料制备降尿酸活性肽的主要方法和结果。LI等[23]以脱脂核桃粉、脱酚脱脂核桃粉为原料,用Alcalase2.4L蛋白酶酶解得到具有降尿酸的生物活性肽Ala-Asp-Ile-(Tyr)2-Glu、Trp-(Pro)2-Lys-Asn。邹琳[27]以鲣鱼为原料,采用酶解法制备降尿酸活性肽,研究发现中性蛋白酶的水解度、氮回收率和黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制活性均为最高。MUROTA等[29]用碱性蛋白酶,从鲨鱼软骨水提取物中分离鉴定出具有降尿酸活性的肽Tyr-Leu-Asp-Asn-Tyr和Ser-(Pro)2-Tyr-Trp-Pro-Tyr。刘洋等[18]以海洋鱼为原料制备降尿酸活性肽,验证了中性蛋白酶为最佳酶解用酶。赵谋明等[31]通过单因素试验确定中性蛋白酶和胰酶复合为水解秋刀鱼制备降尿酸活性肽的最佳蛋白酶。在实际应用中,由于酶制剂价格较为昂贵,会增加工业化生产时的成本,因此未来可将固定化酶技术应用于降尿酸活性肽的制备中,不仅能实现连续生产,而且固定化酶具有良好的化学稳定性和热稳定性,可重复使用。