《表1 引物序列信息及其退火温度》

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《江口萝卜猪UCP2基因启动子变异分析》

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参考猪UCP2基因DNA序列（GenBank登录号NC＿010451.4），利用Primer Premier 5.0设计2对特异性引物（表1），扩增外显子上游2000 bp启动子序列（图1）；引物委托生工生物工程（上海）股份有限公司合成。PCR反应体系20.0μL:DNA模板2.0μL，2×Taq PCR Master Mix 10.0μL，上、下游引物（10pmol/μL）各2.0μL，ddH2O 4.0μL。扩增程序：95.0℃预变性5 min；95.0℃30 s，退火温度退火30 s，72.0℃30 s，进行35个循环；72.0℃延伸10 min。PCR扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳后采用荧光成像系统进行观察拍照。取电泳条带单一、特异性好且无拖带的PCR扩增产物送至北京诺赛基因组研究中心有限公司进行双向测序。