《表2 辨别长梗黄精与多花黄精的SCAR引物序列及其最适退火温度》

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《长梗黄精的SCAR分子鉴别》

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根据回收的12条ISSR-和SRAP-PCR种间差异片段的测序数据，设计12对SCAR标记特异引物，分别对2个黄精种的20个样品基因组DNA进行扩增。结果显示，在由12对特异引物扩增出的SCAR-PCR图谱中，9对引物未能再现之前ISSR和SRAP-PCR的种间多态性，扩增出长梗黄精预期的特异性片段，表明由ISSR和SRAP标记向SCAR标记的转化失败；另外3对引物则分别将由UBC826和UBC891扩增出的ISSR种间特异性条带和由Me6/em12扩增出的SRAP种间特异性条带转化为了稳定特异的SCAR标记（图2），SCAR-1，-2，-3，分别为150、354和518 bp的长梗黄精特异性片段。通过使用两种不同的PCR酶（TSINGKE与Ta Ka Ra）与2台PCR扩增仪（杭州Bioer与德国Biometra）进行验证，3个SCAR标记均在各自最适退火温度下，PCR扩增结果显示了很好的特异性与可重复性，因此，这3个SCAR标记（多位点SCAR表型）可用于多花与长梗黄精种间的分子辅助鉴别。SCAR标记的特异引物序列、最适退火温度与扩增片段长度等信息见表2。