《表2 光实时定量PCR扩增引物及反应条件》

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《长江中下游稻区不同水旱轮作模式和氮肥水平对稻田CH_4排放的影响》

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Y=C or T；M=A or C；W=A or T；R=A or G

土壤mcrA和pmoA基因丰度测定:分别于水稻移栽后3 d（2018/6/28）、14 d（2018/7/9）、28 d（2018/7/23）利用取土器采集每个小区距稻桩20 cm，耕层（0—20 cm）土壤样品（5点取样法取样），去杂质后混合待用。土壤mcrA和pmoA基因丰度采用实时荧光定量PCR分析。即用土壤DNA快速提取试剂盒提取土壤DNA，用0.8%的琼脂糖凝胶电泳检测所提DNA片段大小，并用超微量紫外分光光度计测定DNA浓度及质量。设计产甲烷菌的mcrA基因、甲烷氧化菌的pmoA基因引物，进行实时荧光定量PCR分析，反应体系为20μL[25]。各基因定量PCR分析所用的引物和反应条件见表2，其中采集信号温度为72℃。