《表1 SRSF2 shRNA序列》

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《剪接因子SRSF2对瘢痕疙瘩成纤维细胞生物学特性的作用研究》

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在PLKO.1 TRC质粒中，插入SRSF2 shRNA序列（表1），敲减序列由北京擎科生物技术有限公司合成。在HEK293T细胞生长密度为60%～80%时，加入上述制备质粒、ps PAX2质粒、pMD2.G质粒（比例分别为4∶3∶1）及转染试剂（France Polyplus公司），转染后收集24 h、48 h及72 h细胞上清，高速离心后弃上清备用。KFb培养密度约60%～80%时，加入制备好的病毒，并按1∶1 000比例加入Polybrene（USA Millipore公司）。感染24 h后更换培养基，3 d后进行后续检测。其中，shRNA scramble为对照序列，不影响基因表达，设为对照组（SC组）；SRSF2 shRNA-A与SRSF2 shRNA-B为2条不同的SRSF2敲减序列，设为实验组，分别为A组、B组。