《表1 Wnt5a-shRNA干扰载体的引物序列》

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《鸡Wnt5a基因慢病毒干扰载体的构建及其稳定表达的胚胎干细胞系筛选》

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小写字母表示酶切位点，其中ggatcc为Bam HⅠ靶点，gaattc为Eco RⅠ靶点。Wnt5a：无翅型MMTV整合位点家族成员5A；shRNA：小发卡或短发卡RNA

基于Wnt5a基因的CDS序列，通过公用网站进行Wnt5a基因的RNA干扰序列设计，根据评分挑选3个RNA干扰靶点序列及1个阴性对照序列，通过GenBank验证该阴性对照序列对任何基因均无干扰效应。在4条DNA链的两端分别加入Bam HⅠ和Eco RⅠ酶切位点粘性末端，中间加入Loop环（TTCAAGAGA）形成Oligo DNA并由上海生工生物工程股份有限公司合成并纯化（表1）。