《表1 引物序列:水稻OsVDAC4诱饵蛋白载体的构建及鉴定》

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《表1 引物序列:水稻OsVDAC4诱饵蛋白载体的构建及鉴定》
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水稻OsVDAC4诱饵蛋白载体的构建及鉴定中,从日本晴幼穗c DNA中分别扩增出用于连接p BT3-N和p BT3-SUC的目的片段Os VDAC4-N和Os VDAC4-SUC。20μL PCR反应体系组成为10×Buffer2μL、2.5 mmol/L d NTPs mixture 1μL、10μmol/L Os VDAC4ORF扩增引物(表1)各0.3μL、5 U/μL Ex Taq 0.1μL、c DNA模板1μL,无菌水15.3μL。PCR反应程序为95℃预变性5 min;95℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸1 min,32个循环;72℃延伸10 min。反应结束后,取2μL产物进行电泳检测,剩下产物用于切胶回收。用Axygen公司的切胶回收试剂盒回收目的片段,具体步骤参照试剂盒说明书。

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