《附表2 用于载体构建的引物序列》

《附表2 用于载体构建的引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《白菜型油菜粒色主效基因BrTT1的调控机制分析》


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采用Primer Premier 5.0软件设计引物Yb-F/-R(附表2),克隆Br TT1的CDS序列,以p GBKT7为载体构建融合表达诱饵载体p GBKT7-Br TT1;采用Primer Premier 5.0软件设计基因特异引物(附表2)分别克隆白菜型油菜类黄酮代谢相关基因Br TT2、Br TT3、Br TT4、Br TT8、Br TT18、Br TTG1、Br TTG2、Br TT10、Br TT7、Br TT5的CDS序列,以p GADT7为载体构建融合表达捕获载体p GADT7-Br TT2、p GADT7-Br TT3、p GADT7-Br TT4、p GADT7-Br TT8、p GADT7-Br TT18、p GADT7-Br TTG1、p GADT7-Br TTG2、p GADT7-Br TT10、p GADT7-Br TT7、p GADT7-Br TT5与p GBKT7-Br TT1质粒分别共转入酵母细胞Y2HGold,并涂布在SD/-Leu/-Trp/-Ade/-His及SD/-Leu/-Trp/-Ade/-His/+X-α-gal的平板上,在30℃恒温培养3 d,同时设阳性对照组(p GADT7-T+p GBKT7-53)和阴性对照组(p GADT7-T+p GBKT7-lamin C),筛选Br TT1的互作蛋白。