《附表3 用于差异表达分析的引物序列》

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《白菜型油菜粒色主效基因BrTT1的调控机制分析》

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根据BRAD数据库信息，利用白菜型油菜中已知类黄酮途径参考基因的CDS序列设计定量引物（附表3），采集田间或温室不同发育时期（开花后21、28、35、42、48、56 d）的黄、黑籽种子，用液氮冷冻后，保存于-80℃超低温冰箱备用。待所有不同发育时期的种子取样完成后，使用EASYspin RNA Rapid Plant Kit （Biomed）提取RNA，使用Prime Script RT reagent Kit with g DNA Eraser （TaKa Ra，http://www.takara.com.cn/）合成c DNA。q RT-PCR反应体系为20μL，包含10μL 2×Promega Go Taq q PCR Master Mix、1μL 20μmol L-1正向引物、1μL 20μmol L-1反向引物、100 ng c DNA第一链，添加dd H2O至20μL。反应程序为94℃2 min；94℃3 s，60℃30 s，40个循环；60～95℃，熔解曲线分析。使用2-（35）（35）Ct法计算基因的表达量[36]，28S r RNA基因作为内参基因。