《表2 反转录及real-time PCR引物》

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《利用双重sgRNAs构建miR-223全基因敲除小鼠》

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颈椎脱臼法处死小鼠，取肝脏组织匀浆后提取总RNA，RNA提取按参考文献进行[9]。分别建立miR-233-3p、miR-223-5p及相对应的RNU6B内参Real time PCR检测体系，基因定量采用2-△△CT方法。反转录及Real time PCR引物如表2所示。