《表2 Real-time PCR引物序列》

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《壳寡糖与屎肠球菌对肉仔鸡生长性能、免疫功能及肠道短链脂肪酸含量的影响》

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总RNA采用RNAiso Plus试剂（TaKaRa，日本）提取，步骤参见Wang等[8]。RNA浓度和纯度采用Nanodrop 2000测定，用0.8%的琼脂糖凝胶电泳检查其完整性，浓度、纯度和完整性均符合要求的RNA进行反转录。反转录采用PrimeScript?RT reagent Kit with gDNA Eraser（Perfect Real Time）试剂（TaKaRa，日本）。操作按照试剂盒说明书进行，取910 ng RNA反转录为cDNA，-30℃保存备用。qPCR在7500荧光定量PCR仪（Applied Biosystems，Foster City，California，USA）上进行，试剂为SYBR?Premix Ex Taq?（TaKaRa，日本）。PCR反应条件参考试剂盒说明书。反应结束后用熔解曲线和琼脂糖凝胶电泳检测表达产物的特异性。用2-??Ct计算相对表达量，目的基因及内参基因的引物序列见表2。