《表2 real-time PCR引物序列》
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《剪接因子SRSF2对瘢痕疙瘩成纤维细胞生物学特性的作用研究》
TRIzol试剂提取细胞总RNA,以Oligo(dT)(USA Promega公司) 为引物,dNTP Mix(USA Invitrogen公司)为原料,采用M-MLV逆转录酶(USA Promega公司)合成cDNA。总反应体系25μl,模板RNA为1μg。取上述合成cDNA,利用2×SYBR q PCR Master Mix(Swiss Roche公司)配制20μl的PCR反应体系。反应条件为:95℃预变性5 min,95℃变性15 s,60℃复性及延伸30 s,40个循环,然后进行60~95℃的溶解曲线分析。采用Roche 480荧光定量PCR仪进行反应和基因表达的相对定量分析,以GAPDH作为内参基因进行标准化。检测基因引物均由北京擎科生物技术有限公司合成(表2)。实验重复3次,每次3个复孔。
图表编号 | XD0084012100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.04.25 |
作者 | 潘静、焦虎、肖苒 |
绘制单位 | 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心、中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院整形九科、中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心 |
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