《表2 Real-time PCR所用引物》

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《重组GSTA3蛋白对福美双诱导的肉鸡TD中抗凋亡基因BAG-3表达的影响》

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F代表上游引物；R代表下游引物

采用Real-time q PCR对BAG-3基因m RNA的表达进行检测（表2）。Real-time qPCR反应体系如下：5.0μLSYBR Premix Ex Taq II（2×），0.25μL PCR Forward Primer(10μmol·L-1），0.25μL PCR Reverse Primer（10μmol·L-1），0.1μL ROX Reference DyeⅡ（50×），1.0μL RT反应液（c DNA溶液），3.4μL ddH2O。反应条件：预变性反应1 cycle，95℃3 min；PCR反应42 cycles，95℃30 s，55℃30 s；溶解曲线分析1 cycle，55℃30 s，95℃30 s。然后利用2.0%的琼脂糖凝胶电泳对PCR反应产物进行鉴定。以18S rRNA作为内参基因，并用2-△△Ct法计算目的基因在胫骨生长板的相对表达量。