《表1 Real-time PCR所用引物序列》

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《低频振动对小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化及相关基因表达的影响》

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干预14天后收获细胞，每107个细胞加入1 ml Trizol进行裂解，冲打后冰上静置5 min，将Trizol移至1.5 ml EP管，加入0.2 ml三氯甲烷，孵育3 min，4℃、1 200×g离心15 min，将上层清液转移到一个新的EP管中，并加入0.5 ml异丙醇，4℃、1 200×g离心10 min，EP管底部即为RNA，弃上清，再用75%乙醇洗涤所提RNA一次，并调整两组总RNA浓度一致，采用逆转录试剂盒进行逆转录为c DNA。Real-time PCR检测:Ⅰ型胶原蛋白（collagen typeⅠ，ColⅠ），骨桥蛋白（osteopontin，OPN），骨钙素（osteocalcin，OCN），骨保护素（osteoprotegerin，OPG）和破骨细胞分化因子（receptor activator of NF-κB ligand，RANKL）等基因的表达（内参选用18S）。所用引物序列如表1所示。