《表2 Real-time PCR引物》

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《H5N1禽流感病毒蛋白对1F1TM基因家族转录的影响》

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将SYBR荧光染料（SYBR Green）加入到聚合酶链反应（PCR）中，在ABI 7500快速实时系统（Life Technology）中进行实时荧光定量PCR（Real-time PCR）。反应条件为:95℃10 min，然后94℃30 s，60℃1min，40个循环，最后72℃7min。在含有10 ul SYBR Green混合物中，加入8.5 ul双蒸水，1 ul正向和反向引物以及0.5 ul cDNA模板，进行反应。β-actin作为内参，以使mRNA表达水平标准化。熔解曲线分析证实了特异性PCR产物的产生。2-ΔΔCT方法用于量化基因的相对mRNA表达水平。人源β-actin[10]、IFITM1、IFITM2、IFITM3引物设计如表2所示，Real-time PCR引物由华大基因合成。