《表4 南极犬牙鱼中磷脂的相对含量及结构解析》

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《IKnife-REIMS联用技术对南极犬牙鱼脂质组学轮廓检测》

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对质谱图4降噪、去同位素等处理，筛选峰面积大于3.00×105的离子峰，根据其分子质量测定值推算其可能的化学结构，并使用二级质谱进行验证。以m/z 883.53为例，其离子质量与磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol，PI）离子[PI 38∶5-H]-（C47H80O13P-，883.534 2）最为接近，通过子离子扫描将母离子解离得到，可观察到由m/z 883.53断裂的脂肪酸链子离子m/z 283.2（FA 18∶0）和m/z 301.1（FA 20∶5），碳原子数和双键数与前期推测38∶5吻合，故此可确认m/z 883.53为[PI 38∶5-H]-。通过这种方法可对大多数磷脂离子结构进行确认，部分低丰度离子因为子离子信号响应不足未做二级质谱确认。南极犬牙鱼肌肉组织中共鉴定磷脂离子峰10种，质量范围m/z 736.49～909.55，根据峰面积采用归一化法计算相对丰度，相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）为3.28%～6.21%。信号最强离子峰m/z 885.55经鉴定为[PI38∶4-H]-，相对丰度达到了19.30%；其次为磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine，PE）离子m/z 790.54（[PE40∶6-H]-），相对丰度为15.24%。通常鱼类组织中磷脂酰胆碱（phosphatidylcholine，PC）含量最高，PE次之，PI、磷脂酰甘油（phosphatidylglycerol，PG）和磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine，PS）的含量相对较少[20-21]。然而本实验中PC和PE分子检出较少，原因可能是i Knife输出能量较高，电切过程中通过电能传输导致PC丢失胆碱基团，PE丢失氨基基团，最终生成磷脂酸（phosphatidyl acid，PA）离子[PA-H]-[22]。该推论印证了结果中较多[PA-H]-离子的检出，如m/z 747.50（[PA 40∶6-H]-）、m/z 763.56（[PA O-42∶5-H]-）等。Balog等[23]使用iKnife-REIMS联用技术对牛肉、马肉等动物肌肉组织进行脂质轮廓分析，检出的脂质同样以PE、PA、PI为主。